Operation Steps of Integrated Horizontal Electrophoresis System with Electrophoresis Tank dan Blue Light Transilluminator.

Please ensure that the horizontal electrophoresis tank, gel tray, sample comb, gel maker and other components are clean and dry before gel preparation.

1. Preparation

Weigh an appropriate amount of agarose into an Erlenmeyer flask, add an appropriate amount of buffer, place it in a water bath, a magnetic heating stirrer or a microwave oven and heat until it is completely melted, shake well and make an agarose gel solution.

2.Gel Making

Place the gel maker horizontally on the experimental bench, select a suitable gel tray (different sizes of gel trays are selected according to different experimental needs, the specifications of the gel tray are 120mmX120mm , 120mmX60mm , 60mmX120mm , 60mmX60mm), put the gel tray Place it in the gel maker (two pieces of 60mmX60mm gel can be made at the same time, and only one piece can be made for other specifications) and put the sample comb in a fixed position. Add 5ul SerRed (or other nucleic acid dyes) solution to the agarose gel cooled to about 55°C . After mixing, carefully pour it into the gel tray, and slowly spread the gel until the entire surface of the gel tray is uniform. For the gel layer, let stand at room temperature until the gel is completely solidified, and then gently pull out the sample comb vertically to complete the preparation of the gel plate.

3.Sample Loading

Take the prepared gel and the gel tray out of the gel maker together and place them in the electrophoresis box with the sample addition hole close to the negative electrode (black is the negative electrode). Add running buffer until the gel plate is covered.

Use a 10ul micropipette to add the samples to the sample grooves of the rubber plate respectively. After each sample is added, a sample addition head should be replaced to prevent contamination. When adding samples, do not damage the gel surface around the sample wells (pay attention to the order of adding samples).

4.  Electrophoresis

Cover the top cover according to the correct position of the positive and negative poles (red is positive, black is negative), insert the electrophoresis wire into the electrophoresis power supply according to the correct color, and select the appropriate voltage to start electrophoresis (the specific electrophoresis parameters are adjusted according to the actual experimental parameters).

The sample moves from the negative (black) to the positive (red) direction. As the voltage increases, the effective separation range of the agarose gel decreases. The electrophoresis was stopped when the bromophenol blue moved to about 1 cm from the lower edge of the gel plate.

5.  Obsersation

This integrated horizontal electrophoresis instrument is equipped with a blue light light transilluminator, which can observe the electrophoresis situation in real time with (SPW-6S electrophoresis power supply).

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Langkah-langkah Pengoperasian

Pastikan tangki elektroforesis horizontal, baki gel, sisir sampel, pembuat gel, dan komponen lainnya bersih dan kering sebelum menyiapkan gel.

1. Persiapan

Timbang agarosa dalam jumlah yang sesuai ke dalam labu Erlenmeyer, tambahkan buffer dalam jumlah yang sesuai, letakkan di penangas air, pengaduk pemanas magnetik, atau oven microwave dan panaskan hingga meleleh sepenuhnya, kocok dengan baik, dan buat larutan gel agarosa.

2. Pembuatan Gel

Tempatkan pembuat gel secara horizontal pada bangku percobaan, pilih baki gel yang sesuai (berbagai ukuran baki gel dipilih sesuai dengan kebutuhan percobaan yang berbeda, spesifikasi baki gel adalah 120mmX120mm, 120mmX60mm, 60mmX120mm, 60mmX60mm), letakkan baki gel di pembuat gel (dua lembar gel 60mmX60mm dapat dibuat pada saat yang sama, dan hanya satu lembar yang dapat dibuat untuk spesifikasi lain) dan letakkan sisir sampel pada posisi tetap. Tambahkan 5ul larutan SerRed (atau pewarna asam nukleat lainnya) ke gel agarosa yang didinginkan hingga sekitar 55°C. Setelah tercampur, tuangkan dengan hati-hati ke dalam baki gel, dan ratakan gel secara perlahan hingga seluruh permukaan baki gel merata. Untuk lapisan gel, diamkan pada suhu ruangan hingga gel benar-benar padat, lalu tarik sisir sampel secara vertikal dengan hati-hati untuk menyelesaikan persiapan pelat gel.

3. Pemuatan Sampel

Keluarkan gel yang telah disiapkan dan baki gel dari pembuat gel bersama-sama dan letakkan di kotak elektroforesis dengan lubang penambahan sampel dekat dengan elektroda negatif (hitam adalah elektroda negatif). Tambahkan buffer yang mengalir hingga pelat gel tertutup.

Gunakan mikropipet 10ul untuk menambahkan sampel ke alur sampel pelat karet secara berurutan. Setelah setiap sampel ditambahkan, kepala penambahan sampel harus diganti untuk mencegah kontaminasi. Saat menambahkan sampel, jangan merusak permukaan gel di sekitar sumur sampel (perhatikan urutan penambahan sampel).

4. Elektroforesis

Tutup penutup atas sesuai dengan posisi kutub positif dan negatif yang benar (merah positif, hitam negatif), masukkan kabel elektroforesis ke catu daya elektroforesis sesuai dengan warna yang benar, dan pilih tegangan yang sesuai untuk memulai elektroforesis (parameter elektroforesis spesifik disesuaikan menurut parameter eksperimen yang sebenarnya).

Sampel bergerak dari arah negatif (hitam) ke arah positif (merah). Saat tegangan meningkat, rentang pemisahan efektif gel agarosa menurun. Elektroforesis dihentikan saat bromofenol biru bergerak sekitar 1 cm dari tepi bawah pelat gel.

5. Pengamatan

Instrumen elektroforesis horizontal terintegrasi ini dilengkapi dengan transiluminator cahaya biru, yang dapat mengamati situasi elektroforesis secara real time dengan (catu daya elektroforesis SPW-6S).